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試劑準備不當可能影響酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA結果
在實驗室,對試劑準備一般不太注意,通常的做法是,在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標本的檢測出現(xiàn)假陰性。
因此,在ELISA測定中試劑的準備*為關鍵的是,在實驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20min以上后,再進行測定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應步驟中,能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實驗室使用時對所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應保證質(zhì)量。
此外,當試劑盒以OPD為底物時,則底物溶液應在反應顯色前臨時配制。
樣品要求
·客戶需提供待檢測抗體和包被用抗原。
·檢測的樣本為細胞培養(yǎng)上清、人和動物的血清、血漿。
·樣本收集后應立即-20℃保存,若長期保存應-70℃。
·樣本量的要求:若一個指標做復孔檢測應不少于250ul,做單孔檢測應不少于120ul。建議若客戶樣本量充足提供500ul以上。
·客戶的樣本收集后,立即按要求保存,切忌反復凍融。外地客戶郵寄需要用干冰運輸。郵寄前請與技術支持溝通確認。
回收率
elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出標準數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關系,說明方法的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標準樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為2.98mg/L,則認為回收率為98%。
對于定量檢測來說,主要還是一個準確度的驗證。不過我看到別人寫的內(nèi)容比我自己想說的要好,所以就貼上去了。相對回收率可能會高于100%的,如果只是說“損失程度”,其實是不準確的。應該說,回收率越接近100%,說明這個試劑盒的準確度越高。
( 人甘露聚糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶(MASP)elisa試劑盒),高質(zhì)量,低價格,進口正品Elisa試劑盒,質(zhì)量保證,提供免費代測服務,熱誠歡迎新老客戶前來咨詢報價,索取說明書,咨詢購買事宜。
更新時間:2024/10/8 9:18:38
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