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保存溫度: 2-8℃
封板膜: 2片(48)/2片(96)
產(chǎn)品用途:科研 實驗
檢測方法:法
標 本:血清
規(guī) 格:20T/48T電話:18221656311
網(wǎng)址:http://www.shhykit.com/
實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中水平。用純化的其抗體包被微孔板,制成固相抗體。往包被單抗的微孔中依次加入本產(chǎn)品,再與HRP標記的其抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中產(chǎn)品的濃度。
試劑盒組成:
1、30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶
2、酶標試劑 6ml×1瓶 8 標準品(240 ng/L) 0.5ml×1瓶
3、酶標包被板 12孔×8條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶
4、樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份
5、顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張
6、顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個
標本要求 :
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
120 ng/L 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
60 ng/L 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
30 ng/L 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
15 ng/L 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
7.5 ng/L1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品*終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
4.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
5.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
操作程序總結(jié):
1.準備試劑,樣品和標準品
2.加入準備好的樣品和標準品,37℃反應(yīng)30分鐘
3.洗板5次,加入酶標試劑,37℃反應(yīng)30分鐘
4.洗板5次,加入顯色液A、B,37℃反應(yīng)10分鐘
5.加入終止液
6.15分鐘之內(nèi)度OD值
7.計算
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更新時間:2024/11/20 9:11:54
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