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在elisa實(shí)驗(yàn)中最可能出現(xiàn)問題的原因與解決方法

閱讀次數(shù):1171   發(fā)布時(shí)間:2013/10/25 10:10:56

        我們常說到的elisa就是是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定,它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。而在elisa實(shí)驗(yàn)中常常會(huì)出現(xiàn)一些問題,那么今天我們就來說在elisa實(shí)驗(yàn)中*可能出現(xiàn)的問題以及解決的方法。

        我們?cè)谠囼?yàn)中可能會(huì)出現(xiàn)所有孔都沒有顯色,那么原因就有可能是微孔加入抗體后,洗板不徹底,微孔中存在游離的抗體。也可能是用錯(cuò)試劑。您在想想是不是在操作中忘記加酶或抗體。       
 所有孔都沒有顯色的問題解決方法:       
1、檢查洗板器械,比如洗板機(jī)管道是否堵塞、洗液是否用完。         
2、在加樣前,要看清瓶簽。         
3、嚴(yán)格按說明書操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn),確保每步都到位。         
您有沒有遇見過所有孔顯色偏低的現(xiàn)象?那么氣原因就有可能是微孔加入抗體后,洗板不徹底,微孔中存在游離的抗體。或者是洗板不干凈。抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。溫度沒達(dá)到要求也會(huì)受到相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)影響。還有可能是每孔加入的試劑量低于說明書要求量。   
所有孔顯色偏低的問題解決辦法:    
(1)手工加蒸餾水洗板時(shí),要避免吸頭接觸微孔,常更換新的蒸餾水。   
(2) 洗板時(shí)要確保每孔都注滿蒸餾水(約400ul),且至少洗板五次。     
(3)嚴(yán)格按說明書要求操作,每次取樣要更換吸頭。     
(4) 控制孵育溫度在25℃。      
(5) 加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,加樣時(shí)務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。 
   
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