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細(xì)節(jié)決定成敗:ELISA試劑盒的這些細(xì)節(jié)你有注意嗎?

閱讀次數(shù)：1165 發(fā)布時(shí)間：2017/7/24 10:40:19

上海恒遠(yuǎn)擁有一對(duì)一全程指導(dǎo)服務(wù)，優(yōu)質(zhì)的ELISA檢測(cè)試劑盒，讓您贏在步，減少實(shí)驗(yàn)錯(cuò)誤。由于ELISA只能檢測(cè)可溶性蛋白的含量，所以應(yīng)保證所有樣本均為澄清的液體，沉淀或懸浮物都應(yīng)離心去除。為了保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性，保存于-20℃或-80℃的樣本在1~6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)；4℃保存的樣本應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。另外，還應(yīng)保證樣本不含NaN3，因?yàn)镹aN3會(huì)抑制HRP的活性，從而導(dǎo)致假陰性的結(jié)果。所以在elisa試劑盒使用之前要注意一些細(xì)節(jié)！

ELISA試劑盒使用時(shí)需留心的細(xì)節(jié)：

（1）不管是試劑盒，還是其它產(chǎn)品，在使用之前都要仔細(xì)閱讀說明書，同時(shí)確定試劑盒是不是在有效期內(nèi)。

（2）標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份，短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者，注意低溫保存。

（3）根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑盒的量。

（4）按說明書將所用試劑盒平衡至室溫，配制所需試劑盒，DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南。

（5）選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì)，若選擇兩個(gè)單抗，必須識(shí)別不同表位的抗體，從同一家公司選擇抗體。

（6）若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。

（7）當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí)，如血清，建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig。

（8）準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等。

ELISA試劑盒加板時(shí)產(chǎn)生氣泡的處理辦法：

A、使用吹風(fēng)機(jī)，將吹風(fēng)機(jī)打開，并調(diào)節(jié)到溫度，對(duì)96孔板吹1-2秒就可以了。

B、采用更好材質(zhì)的板、或采用專門的96孔板振蕩器。