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ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制教程(附圖)

閱讀次數(shù):4465   發(fā)布時(shí)間:2014/9/17 9:14:23

     很多朋友都知道在ELISA結(jié)果處理的這項(xiàng)環(huán)節(jié)中,繪制曲線可以利用表格制圖的方式,類似的文章可能您見過(guò)很多,但大多都會(huì)文字性的表達(dá)。今天上海恒遠(yuǎn)生物帶您一起來(lái)看看elisa試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制教程(附圖)。

 1.ELISA實(shí)驗(yàn)中樣品都要做復(fù)孔或三孔,然后計(jì)算每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品">標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。
 2.平均OD值減去空白孔的OD值。
 3.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
     以減去本底后的OD值為X軸,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個(gè)合適的計(jì)算方法。建議使用合適的軟件來(lái)作圖,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對(duì)數(shù)、對(duì)數(shù)、四參數(shù)方程等)并從中選擇一條*合適的方程。要想檢驗(yàn)?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合,可以將標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為未知數(shù),將對(duì)應(yīng)的OD值帶入該方程,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)品的濃度,得到的結(jié)果應(yīng)該與實(shí)際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度的那條曲線。
    以下是CurveExpert1.4的使用過(guò)程:
 1.將OD值和標(biāo)準(zhǔn)品濃度數(shù)據(jù)復(fù)制粘貼到表格中
    
 2.生成和選擇標(biāo)準(zhǔn)曲線
    
    
 3.通過(guò)曲線計(jì)算樣品濃度
    
    
 輸入OD值,點(diǎn)擊“計(jì)算”按鈕,得到樣品的準(zhǔn)確濃度。
 或者得到相關(guān)方程,通過(guò)excel來(lái)計(jì)算濃度。
    
    
  如果需要導(dǎo)出方程,可點(diǎn)擊“復(fù)制”,粘貼至excel中。
 4.對(duì)于OD值落在標(biāo)準(zhǔn)曲線之外的情況
    如果樣品的OD值超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線的值,在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)該先將樣品稀釋從而得到準(zhǔn)確的濃度。樣品的*終度應(yīng)該是計(jì)算出的濃度乘以稀釋倍數(shù)。
    以上就是完整的ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制教程,了解更多相關(guān)ELISA的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,可來(lái)電給我公司業(yè)務(wù)員,或在本網(wǎng)站中留言咨詢。上海恒遠(yuǎn)歡迎您!

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