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上海恒遠與您分享：氣泡對ELISA實驗結果的影響

點擊次數：13078 發(fā)布時間：2017/6/21 10:13:31

在做ELIS實驗的過程中，加樣時難免會出現氣泡。通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍，導致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使孔內反應不均一。在做實驗的過程中，有時為了打干凈槍頭里面的液體，很容易產生氣泡，那么氣泡對ELISA實驗結果會有什么影響呢?

1.通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍，導致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使孔內反應不均一。

2.包被時有氣泡的話，將導致包被不完全實際包被量下降－－弱陽性甚至假陰性。

3.封閉時有氣泡的話，將導致大量未結合位點的存在，引起非特異性結合－－本底增高，假陽性。

4.加樣時有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結合－－弱陽性甚至假陰性。

5.加二抗時有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結合－－弱陽性甚至假陰性（競爭法相反－－－－假陽性）。

6.加顯色液時有氣泡的話－－－顯色不完全。

7.加終止液時有氣泡的話（1、不能完全終止反應 2、影響酶標儀比色，OD值增高）

8.洗滌時有氣泡的話，非特異性結合物不能完全洗去，做無用功。

避免方法：

1、加樣時盡量靠近孔底（不要接觸孔底），用力均勻，不要過快過猛。

2、封閉時一定要加滿孔。

3、洗滌時一定要加滿孔(重要），氣泡會浮上來*終驅除。手工洗板時一定要吸干水分并用力拍干。

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