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ELISA試劑盒幾種常用檢測方法你都知道嗎?

點擊次數：12982 發(fā)布時間：2017/2/14 10:49:58

間接法是檢測抗體*常用的方法，其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下：

(1)將特異性抗原與固相載體連接，形成固相抗原：洗滌除去未結合的抗原及雜質。

(2)加稀釋的受檢血清：其中的特異抗體與抗原結合，形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質由于不能與固相抗原結合，在洗滌過程中被洗去。

　　(3)加酶標抗抗體：與固相復合物中的抗體結合，從而使該抗體問接地標記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體，可用酶標羊抗人IgG抗體。

　　(4)加底物顯色：顏色深度代表標本中受檢抗體的量。

　　本法只要更換不同的固相抗原，可以用一種酶標抗抗體檢測各種與抗原相應的抗體。

Elisa間接法、競爭法、捕獲法，捕獲法測IgM抗體

　　血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在，后者會干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗體多用捕獲法，先將所有血清IgM(包括特異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上，在去除IgG后再測定特異性IgM。操作步驟如下：

　　(1)將抗人IgM抗體連接在固相載體上，形成固相抗人IgM。洗滌。

　　(2)加入稀釋的血清標本：保溫反應后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質成分。

　　(3)加入特異性抗原試劑：它只與固相上的特異性IgM結合。洗滌。

　　(4)加入針對特異性的酶標抗體：使之與結合在固相上的抗原反應結合。洗滌。
(5)加底物顯色：如有顏色顯示，則表示血清標本中的特異性IgM抗體存在，是為陽性反應。

原創(chuàng)作者：上海恒遠生物科技有限公司

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