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微生物過氧化氫酶（CAT）ELISA試劑盒實驗原理及注意事項

點擊次數(shù)：12918   發(fā)布時間：2015/11/5 10:54:44

 *近咨詢微生物試劑盒的客戶還挺多的，在10月底的時候已經(jīng)有好幾個客戶在我司訂購了幾個微生物elisa試劑盒，在訂購微生物試劑盒之前有的客戶問到實驗過程中應注意哪些問題，下面是我司錢經(jīng)理為客戶提供的微生物試劑盒注意事項。
微生物過氧化氫酶（CAT）ELISA試劑盒實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中過氧化氫酶（CAT）水平。用純化的過氧化氫酶
（CAT）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入過氧化氫酶（CAT），
再與HRP 標記的過氧化氫酶（CAT）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底
洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*
終的黃色。顏色的深淺和樣品中的過氧化氫酶（CAT）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長
下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中過氧化氫酶（CAT）濃度。
微生物過氧化氫酶（CAT）ELISA試劑盒注意事項：
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值
大于標準品孔孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計
算時請*后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。

原創(chuàng)作者：上海恒遠生物科技有限公司

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