現(xiàn)市場上海有各種品牌的試劑盒,有些各院校的學(xué)生首次接觸
elisa試劑盒做實驗,在選擇方面難免有些疑惑,下面上海恒遠(yuǎn)來告訴您在選擇試劑盒應(yīng)注意以下幾點:
衛(wèi)生部規(guī)定乙肝試劑,丙肝試劑,艾滋病試劑,梅毒試劑及血型試劑必須使用經(jīng)衛(wèi)生部生物制品檢定所檢定合格,并貼有防偽標(biāo)簽的產(chǎn)品,試劑應(yīng)從靈敏度,特異性,精密度,穩(wěn)定性,簡便性,安全性及經(jīng)濟(jì)性作出全面的評價。
靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的量的能力;2)為試劑對人群或大量樣品中陽性檢出的能力(假陰性越少越好) ,取決于包被物的全面性。
特異性:指試劑正確檢定不存在的被檢物質(zhì)的能力(無假陽性),取決于包被抗原(體)及標(biāo)記抗原(體)
的純度及特異性。
精密度:ELISA 試劑一般指其批內(nèi)CV,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍試劑盒選擇
穩(wěn)定性:試劑在規(guī)定條件下能儲存的時間,一般采用破壞性試驗即將試劑存放于37℃保存,定期測定其靈敏度,特異性和精密度等指標(biāo),直到其質(zhì)量指標(biāo)開始下降為止,通常認(rèn)為 37℃每穩(wěn)定一天相當(dāng)于4-10℃保存一個半月。
簡便性:指在不影響試劑的前三項指標(biāo)的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性試驗中結(jié)果判斷簡單明了,)定量試驗結(jié)果計算也應(yīng)簡單。
安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本而市場價格比較合理。
試劑評價需要有權(quán)威的血清考核盤( Panel)進(jìn)行檢測,一般實驗室不易從生檢所或臨檢中心取得,每進(jìn)一次試劑評價一次也很麻煩?梢酝ㄟ^間接的信息對試劑進(jìn)行選擇。
根據(jù)該試劑生檢所批批檢定報告,了解其質(zhì)量水平,按照質(zhì)量計劃選擇靈敏度高的或特異性高的試劑;
通過詢問試劑包被物的組成,如原料來源(基因工程或合成多肽),片段的組合(按比例混合或化學(xué)合成),片段的長短等判斷試劑的優(yōu)劣;
參考室間質(zhì)評評價報告中對試劑的評價結(jié)果,這比較客觀公正,因為統(tǒng)計數(shù)字均來自各參評醫(yī)院,反映了試劑在某一地區(qū)的使用情況;
根據(jù)權(quán)威部門發(fā)布的試劑評價結(jié)果,了解市場上試劑的質(zhì)量優(yōu)劣。
儀器質(zhì)控
為使儀器保持*佳工作狀態(tài)應(yīng)建立維護(hù)和校正儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP),所要控制的儀器包括移液器(加樣槍),水浴箱(溫箱),洗板機(jī)和酶標(biāo)儀。
移液器:ELISA 加樣量。5-100ul),其準(zhǔn)確性直接影響實驗結(jié)果,利用稱重法檢查:吸取刻度指示量的水,萬分天平稱重后計算吸量是否準(zhǔn)確,一般應(yīng)在±10%以內(nèi);
水浴箱 經(jīng)常檢查水浴箱溫度計所示的溫度和水中(或溫箱內(nèi))實測溫度是否一致,允許有±1℃的誤差;
原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司